摘要:目的:比较小鼠角膜上皮细胞消化培养法和组织块培养法。方法:分别使用消化培养法和组织块培养法培养小鼠角膜上皮细胞。比较两种方法中小鼠角膜上皮细胞的克隆形成率(CFE)和群体倍增(PD)。通过Western blotting方法检测p63、角蛋白19以及角蛋白12的表达。结果:其中80%组织块培养法的原代培养可成功传代,而仅12%的消化培养法原代培养可成功传代;两者比较有显著性差异(P<0.05)。传代培养中,组织块培养法中55%的第一代(P1)细胞可以传代超过P10并继续稳定传代至少可传至P25。而消化培养法传代至P2即不能融合。在P1,组织块培养法细胞的CFE高于消化培养法(P=0·02);而组织块培养法P20细胞的CFE又显著高于其P1细胞(P=0.001)。免疫荧光染色显示消化培养法的P1细胞和组织块培养法的P1,P20细胞均表达p63和K19。K12仅在消化培养法的P1细胞和组织块培养法的P1中表达,而组织块培养法的P20细胞中,K12阴性表达。结论:小鼠角膜上皮细胞的培养,组织块培养法优于消化培养法。

摘要:目的:研究人脐带静脉管(HUV)植入联合应用丝裂霉素C(MMC)在非穿透性小梁手术(NPTS)中应用的临床效果。方法:选取中、晚期原发性开角型青光眼病例32例(46眼)。患者分为两组:HUV+MMC组(n=25),透明质酸生物胶(SKGEL)+MMC组(n=21);行非穿透性小梁手术,HUV+MMC组将HUV置于巩膜床内,SKGEL+MMC组将SKGEL缝合固定于巩膜床上。术后分别于1,2,4wk;2,6,12mo裂隙灯下观察术口愈合情况、滤过泡情况、前房炎症反应、前房深度、有无出血等。测量眼压、最佳矫正视力,计算手术成功率。结果:HUA+MMC组的术后眼压平均在16mmHg,HUA+MMC组与SKGEL+MMC组在术后1,2,4wk;2,6,12mo时P>0.05,差异无显著性;功能性滤过泡术后1wk～12mo时HUA+MMC组与SKGEL+MMC组比较无显著性差异(P>0.05),末次随访HUA+MMC组成功(完全成功和条件成功)21眼,成功率84%;SKGEL+MMC组成功18眼,成功率86%。两组末次随访手术成功率比较无显著性差异(P>0.05)。结论:HUV联合MMC在NPFS中对术眼有明显而稳定的降压作用,大大提高了NPTS的手术成功率。脐带静脉管取材方便,抗原性低,有良好的组织相容性,眼局部反应轻,无毒副作用,且与SKGEL植入物相比,价格便宜,是理想的NPTS中的植入物。

摘要:目的:探讨准分子激光术后视网膜脱离手术的特点。方法:本研究选取准分子激光术后发生视网膜脱离患者10例(11眼),着重分析11眼的视网膜脱离特点,处理方法及手术并发症。结果:视网膜脱离以多发裂孔(73%)和巨大裂孔(27%)为显著特征。所有患者行巩膜扣带术,其中3例联合玻璃体切割及硅油填充术。术后1mo取出硅油。9例患者视网膜均在首次手术中复位。术后发生LASIK角膜瓣脱离1例和角膜上皮下混浊1例。结论:准分子激光术后患者在随访中应密切观察,必要时散瞳检查,准分子术后视网膜脱离的手术中,巩膜扣带术是必要的,术中要注意保护角膜组织。

摘要:目的:分析肝脓肿致内源性眼内炎的临床表现与治疗效果。方法:对我院2005/2010年诊治的因肝脓肿致内源性眼内炎7例(9眼)患者进行回顾性分析。所有患者取血或玻璃体标本行微生物培养;4眼行玻璃体切割术,2眼因全身状态差行玻璃体注药术,3眼因眼内炎表现较轻仅应用广谱抗生素治疗。结果:其中2眼以眼内炎为首诊,经全身检查后发现患有肝脓肿;4眼伴有糖尿病,1眼伴有糖耐量异常。血或玻璃体标本微生物培养阳性6眼(67%),其中肺炎克雷伯菌3眼,大肠埃希菌1眼,白色念珠菌2眼。经药物或手术治疗后,5眼获得手动及以上视力,1眼存有光感,3眼失明。结论:肝脓肿致眼内炎是一种严重危害视功能的眼科急症,及早就医、及时诊断、及时抗感染治疗是控制感染的最有效方法。玻璃体切割术联合抗生素治疗,有助于保存患者的部分视力。

摘要:目的:测定76例经治疗后的眼外伤儿童立体视训练前后双眼视功能,评价双眼视功能训练对眼外伤儿童立体视的影响。方法:收集2006-01/2009-12期间在我院诊治的儿童眼外伤76例76眼,进行一期修复后,即进行双眼视功能训练。使用AIT-1000同视机检查眼外伤儿童训练前后融合和远立体视功能,使用Titmus立体图检查近立体视功能。结果:训练前无双眼视功能者26眼(34%),训练后无双眼视功能者16眼(21%);训练前有融合功能者27眼(35%),训练后有融合功能者48眼(63%);训练前有远立体视功能者23眼(30%),训练后有远立体视功能者29眼(38%),训练前有近立体视功能者14眼(18%),训练后有33眼(43%)。经统计分析,双眼视功能在训练前后的差异具有统计学意义。结论:对眼外伤儿童及时行双眼视功能训练,有助于重建患儿的双眼视功能。

摘要:目的:观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对兔急性高眼压条件下视网膜节细胞(retinal ganglial cells,RGC)核因子-κB(nuclear factor-kappe B,NF-κB)表达及血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度的影响。方法:将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组。处理组于急性高眼压模型建立前7d,每天给予Res30mg/kg(3mL)ip,第8d经前房灌注升高眼压达90mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材;对照组用等剂量的生理盐水代替Res给予ip,余同处理组;正常组不做上述处理直接取材。观察兔视网膜组织病理学结果,免疫组织化学检测RGC中NF-κB表达及血清中IL-6浓度的变化。结果:与正常组相比,处理组和对照组表达在RGC的NF-κB明显增加,外周血清中IL-6浓度明显增高(P<0.05);与对照组相比,处理组NF-κB的表达明显减少,外周血清中IL-6浓度明显降低(P<0.05)。结论:Res通过降低兔急性高眼压RGC中NF-κB的表达和血清中IL-6浓度,减轻RGC的损伤,对视网膜具有一定的保护作用。

摘要:目的:观察SD大鼠视神经挫伤后樟柳碱(anisodine,AT3)联合地塞米松(dexamethasone,Dex)治疗对闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,F-VEP)和视网膜电图(electroretinogram,ERG)的影响。方法:成年雌性SD大鼠30只,均以左眼为实验眼,采用随机数字法分为A,B,C共3组,利用压力恒定的无创反向镊夹持大鼠视神经6s建立视神经挫伤模型,A组建立模型前1d开始每日给予尾静脉注射0.25mL(0.5mg)Dex,同时左眼球后注射0.25mLAT-3;B组尾静脉注射同A组,但球后注射生理盐水;C组静脉及球后均给予生理盐水。记录并比较3组大鼠建模前及建模后0.5,1,7,14d的F-VEP的P1波和ERG的b波振幅和峰潜时变化。结果:C组视神经损伤0.5d后,F-VEP振幅值降低与正常相比有显著性差异,峰潜时在1d后与正常相比有统计学意义,并且在观察时间内随时间其峰潜时和波幅呈进行性下降。B组在7d后F-VEP振幅值明显高于与对照组(P=0.031),峰潜时短于对照组(P=0.012),C组在7d后F-VEP振幅值明显高于对照组(P=0.042),峰潜时短于对照组(P=0.019)。结论:AT3联合Dex对大鼠视神经挫伤后神经传导功能的恢复较单纯应用Dex明显。

摘要:目的:在激光扫描共聚焦显微镜(laserscanning confocal microscopy,LSCM)下测定小梁细胞经染料木素(genistein,Gen)作用后钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。方法:运用组织块培养法获得三代牛眼小梁细胞,Fulo-3/AM负载后,于LSCM下动态扫描不同浓度Gen作用后胞内荧光强度变化,得出[Ca2+]i值。结果:10-6,10-5,10-4mol/LGen可使小梁细胞[Ca2+]i呈剂量依赖性降低,其中10-5mol/LGen可使小梁细胞[Ca2+]i由328.62±16.77nmol/L减少至309.69±16.57nmol/L(n=8,P<0.05)。结论:Gen可通过松弛小梁网而致房水流出阻力减小、眼压下降。

摘要:目的:研究钙调素拮抗剂小檗胺(berbamine,BER)对兔Tenon囊成纤维细胞和兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养兔Tenon囊成纤维细胞,经不同浓度BER处理不同时间后,细胞计数Kit8(CCK8)法检测BER对兔Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测其凋亡率及细胞周期的变化。HE染色检测BER对兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞增殖的抑制作用。结果:兔Tenon囊成纤维细胞经不同浓度BER处理不同时间后细胞增殖受到抑制,并呈时间剂量依赖性。流式细胞仪检测发现BER处理后兔Tenon囊成纤维细胞呈现G1期阻滞,细胞凋亡率明显增加,20mg/LBER处理9h,细胞凋亡率从0.64%增加到31.86%。HE染色显示BER显著抑制兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞的增殖。结论:小檗胺在体内外均能抑制成纤维细胞的增殖,其可能是通过诱导细胞凋亡方式抑制兔Tenon囊和滤过道内成纤维细胞的增殖。

摘要:目的:探讨银杏叶提取物(extractof Ginkgo bilobaleaves,EGb)对大鼠持续性高眼压损伤下的视网膜神经节细胞(retinalganglioncells,RGC)活性的保护作用。方法:健康SD大鼠20只,采用烧烙法,烙闭大鼠左眼2条浅层巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型,从中选出眼压稳定在实验要求(眼压>26mmHg)的大鼠12只随机分为A组(对照组)和B组(EGb治疗组)。治疗组予EGb每日150mg/kg灌胃治疗,对照组为空白对照,不做任何处理。1mo后处死大鼠摘取眼球,制作眼球标本,常规石蜡切片,AgNOR染色观察RGC细胞核内的银染颗粒。采用计算机图象分析系统对RGC细胞核内的银染颗粒进行定量分析。结果:A组大鼠模型眼RGC细胞核内银染颗粒为1.33±0.07个/细胞,B组为1.83±0.09个/细胞,B组模型眼较A组模型眼RGC细胞核内银染颗粒多,其差异有显著性意义(P<0.05)。两组模型眼较正常眼的RGC细胞核内银染颗粒明显减少,其差异有显著性意义(P<0.05)。结论:大鼠持续性高眼压可导致RGC细胞核内银染颗粒减少,而EGb对RGC活性有部分保护作用。

摘要:目的:观察色素上皮衍生因子(PEDF)在人晶状体内的分布,探讨人晶状体上皮细胞(LEC)中PEDF表达水平与年龄及白内障发生发展的关系。方法:收集老年性和先天性白内障患者术中所取前囊膜、新鲜眼库眼透明晶状体样品,冰冻切片标本用间接免疫荧光组织化学法检测PEDF蛋白在人晶状体中的分布,前囊膜标本分别用蛋白质免疫印迹(Western-blot)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测LEC中PEDF蛋白和基因的表达水平。结果:人晶状体中存在PEDF蛋白,主要分布于前囊下LEC胞浆中。按透明晶状体、轻度白内障、重度白内障及年龄分组分析,人LEC内PEDF基因及蛋白的表达水平在晶状体由透明变混浊、混浊由轻变重的过程中呈下调趋势(P<0.01),且随着机体的衰老显著下降(P<0.01)。结论:人LEC中PEDF表达随晶状体衰老和白内障发生发展显著下调。

摘要:目的:观察糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者房水和血浆中高迁移率族蛋白-1(high-mobility groupbox-1,HMGB-1)的变化及其临床意义。方法:以西安交通大学第一附属医院眼科2010-08/12住院糖尿病(diabets mellitus,DM)患者为研究对象,按有无DR分为糖尿病无视网膜病变(non-diabetic retinopathy,NDR)组及DR组。DR组按病程分为单纯性糖尿病性视网膜病变(background diabetic retinopathy,BDR)组及增殖性糖尿病性视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)组。设正常对照组,对研究对象分别收集房水和血浆标本,共收集房水28例,血浆40例,均采用双抗体夹心ABC-ELISA法进行人HMGB-1定量ELISA测定。结果:DM患者房水中的HMGB-1浓度明显高于对照组(P<0.05),DM患者按DR病程分组时,HMGB-1浓度未见明显差异(P>0.05)。DM患者血浆中HMGB-1浓度与对照组比较未见明显差异(P>0.05)。结论:HMGB-1在DR的发生中可能起到重要作用,但与DR的病理进程无明显关系。

摘要:目的:研究幼年豚鼠形觉剥夺早期生物学参数变化,得出其形觉剥夺早期过程中屈光动态的变化规律。方法:将20只豚鼠(出生后大约3wk)随机分成2组:MDF组(单眼面罩形觉剥夺组,n=10)和正常对照组(n=10)。面罩组和正常对照组的动物在形觉剥夺开始前和开始后2,4,6,10和14d进行了双眼的生物学测量(屈光力、眼轴各部分长度及视网膜、脉络膜厚度)。结果:MDF组实验眼脉络膜厚度在第10,14d较对侧眼有显著性差异(P<0.05),但较正常对照眼均无显著性差异。结论:豚鼠形觉剥夺早期视网膜并不发生明显的厚度和病理改变,而脉络膜厚度有缩短的趋势。

摘要:目的:观察丹参酮ⅡA对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新途径。方法:用0～320mg/L丹参酮ⅡA作用体外培养的HPF,24～96h后MTT法检测药物对HPF的影响,免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性。结果:80mg/L丹参酮ⅡA作用48h后能显著抑制HPF的增殖(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。丹参酮ⅡA在80～320mg/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可显著抑制HPF的增殖。

摘要:目的:观察分析1CU可调节人工晶状体植入术后近远期调节功能变化。方法:对2006/2008年在我院行白内障超声乳化联合1CU可调节人工晶状体植入术后的患者进行前瞻性随访研究2a,定期检测术眼裸眼远、近视力,最佳矫正远、近视力,分别用主觉近点法、离焦法检测术眼调节功能,并观察评价后囊膜混浊的发生。结果:1CU可调节人工晶状体植入术后1mo和6mo均可获得较好的裸眼远、近视力及最佳矫正远、近视力,其差异无统计学意义;术后1a远、近视力均下降,与6mo相比其差异有统计学意义(P<0.05)。近点法和离焦法检测的调节幅度在术后6mo和1a分别为(1.65±0.88)D,(1.78±0.67)D和(1.24±0.66)D,(1.15±0.62)D,其差异有统计学意义(P<0.05),术后2a为(0.92±0.44)D,(0.71±0.37)D,与术后1a相比差异有统计学意义(P<0.05)。发生后发性白内障的病例术后1a约占29%(10/34),术后2a约占47%(16/34)。结论:1CU可调节人工晶状体植入术后早期患者能够获得良好的远近视力及调节力,但随着后发性白内障的发生,术后1a以后远近视力及调节力均呈不同程度的下降,人工晶状体的特殊设计及晶状体材料可能与囊膜纤维化有较为密切的关系。

摘要:目的:探讨短眼轴性白内障手术难度及术中、术后并发症的预防。方法:对57例63眼眼轴长度为20.26～22.11mm的白内障患者实施小切口非超声乳化白内障摘除术,对71例82眼眼轴长度为20.26～22.11mm的白内障患者实施超声乳化白内障吸除术,对比观察两种术式术后视力及并发症。结果:术后第1wk矫正视力≥0.5的术眼中小切口组占86%,超声乳化组占87%;术后3mo矫正视力≥0.5者均占94%,≥0.8者分别占49%和51%,两组相比无显著性差异。角膜水肿:小切口组为17%,超声乳化组为20%;后囊膜破裂:小切口组5%,超声乳化组5%;虹膜损伤:小切口组3%,超声乳化组1%。结论:短眼轴性白内障患者手术难度大,通过术前降低眼压,术中规范切口,合理使用黏弹剂,维持前房深度,对硬核选择合适的手术方式,患者可获得很好的复明效果。

摘要:目的:测定衍射折射型多焦点人工晶状体眼术后远期的视觉质量。方法:采取随机对照临床试验研究方法,将67例白内障患者分两组,其中30例33眼植入多焦点人工晶状体,37例37眼植入单焦点人工晶状体。术后3mo和1a进行裸眼远视力、中间视力、近视力、矫正远、中、近视力和对比敏感度检查。视功能和生存质量调查问卷评价患者主观的视觉功能。结果:(1)术后多焦点组裸眼近视力优于单焦点组(P<0·05),中间距离视力亦优于单焦点组(P<0.05),两组裸眼和矫正远视力、近视力及最佳矫正远视力下近视力差异无显著性。术后1a和3mo相比,差异无显著性意义。(2)术后两组对比敏感度均低于正常范围,空间分布差异无统计学意义。(3)两组术后多焦点组脱镜率达83%,而单焦点组脱镜率为32%,两组比较差异有显著性(P<0·05)。多焦点组4例有眩光。多焦点组患者对全程视力的满意度高于单焦组患者。结论:多焦点人工晶状体能提供良好的全程视力,但近视力更好,视觉症状轻,脱镜率更高,有效地提高白内障患者术后的视觉质量。

摘要:目的:对比植入AcrySof Toric人工晶状体与AcrySof球面人工晶状体术后的临床效果。方法:收集确诊为老年性白内障并伴有规则角膜散光的患者56例63眼,按照患者自愿原则,分别植入AcrySof Toric人工晶状体(实验组)27例30眼;AcrySofNatural球面人工晶状体(对照组)29例33眼。均施行白内障超声乳化摘除联合人工晶状体植入术,随访时间6mo。观察两组患者术后裸眼远视力、最佳矫正远视力、术前术后角膜散光变化情况、术后散光、AcrySofToric人工晶状体轴位稳定性。结果:两组患者术后1wk,6mo裸眼视力,实验组明显优于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05),两组患者术后1wk,6mo散光比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者术前与术后6mo的角膜散光比较,差异均无统计学意义。术后AcrySof Toric IOL的轴位移动度,术后1d;1wk;1,6moIOL平均轴位移动度分别为:(4.22±1·69)°,(4.64±1.97)°,(4.87±1.91)°,(5.39±1·56)°,差异无统计学意义(F=2.259,P>0.05)。术后6mo96.67%的患眼轴位移动度<10°。结论:与普通球面人工晶状体比较,AcrySof Toric人工晶状体能安全、有效、稳定矫正白内障患者的角膜散光,具有良好的轴位移动稳定性。

摘要:目的:通过对正常人与不同阶段的原发性开角型青光眼患者的氧化应激状况与GDx-VCC的检查进行对比研究,来探讨氧化应激反应在原发性开角型青光眼发病机制中的重要作用。方法:分别对30例60眼正常人、40例50眼早期青光眼和40例60眼中晚期的开角型青光眼患者的血清进行MDA,CAT,VC,SOD,GSH-Px,GST检测并应用GDx-VCC对其RNFL进行检测,分别比较其RNFL参数的不同。最后比较氧化应激指标与GDx-VCC在不同时期的原发性开角型青光眼患者中的相关性。结果:与正常人群相比,早期原发性开角型青光眼患者血清中GST和MDA即有所升高,中晚期患者升高较为明显,而CAT,GSH-Px,SOD,VC早期即有所降低,中晚期则明显降低;早期原发性开角型青光眼患者的RNFL变薄,中晚期患者的RNFL较早期的明显变薄。两种方法所得的各参数均有极显著统计学差异(P<0.01),具有良好地区分正常人和早期原发性开角型青光眼的能力,对于青光眼的分期诊断中具有一致性。结论:氧化应激的检测可作为临床原发性开角型青光眼的辅助检测手段之一。